Мод ГРФ 1-29, CJC-1295 і CJC-1295 з DAC: три назви, дві молекули

У липні 2005 року журнал Endocrinology опублікував роботу монреальської компанії ConjuChem, у якій описано три сполуки одразу: CJC-1288, CJC-1293 і CJC-1295 (2005, т. 146, № 7, с. 3052–3058). Усі три — той самий двадцятидев'ятичленний фрагмент GRF із прибудованим тридцятим залишком, різниця між ними лише в кількості амінокислотних замін. Далі пішла одна, третя. Два інші коди зникли з обігу, а той, що лишився, за двадцять років примудрився стати назвою для двох різних молекул.

Українською ту саму хімію шукають кирилицею: мод ГРФ 1-29, «мод грф 1-29 ціна», «grf 1-29 купити». Три ходові написання — мод ГРФ 1-29, CJC-1295 і CJC-1295 з DAC — покривають дві різні речовини, які розходяться на 279 дальтонів маси. Зрозуміти з назви на етикетці, що саме у флаконі, неможливо в принципі: назва тут не несе інформації, і нижче буде видно, чому так вийшло.

Одразу межа, без якої решта читається неправильно. Polar Peptides постачає CJC-1295 з DAC як реактив для лабораторних досліджень. Це не лікарський засіб, не добавка й не рекомендація щось із цим робити. Нижче — походження назв, регуляторні дати, арифметика мас і спосіб звірити товар із документом на партію; схем введення й дозувань не буде, бо для незареєстрованої сполуки їх нізвідки взяти.

Три коди з однієї статті

Логіка тієї роботи Жетте (Jetté) зі співавторами була проста: узяти короткий фрагмент GRF, який руйнується за хвилини, і пришити до нього хімічний якір, що чіплятиметься до альбуміну плазми. Автори синтезували три малеїмідні похідні hGRF(1-29) і порівняли їх між собою.

Конструкції відрізнялися так. CJC-1288 — це hGRF(1-29) з додатковим лізином у тридцятому положенні, до якого приєднано малеїмідопропіонову кислоту. CJC-1293 — те саме плюс D-аланін у другому положенні. CJC-1295 — та сама прибудова на каркасі з чотирма замінами: D-Ala у другому положенні, Gln у восьмому, Ala у п'ятнадцятому, Leu у двадцять сьомому. Для подальшої фармакокінетики відібрали третю.

Звідси випливає головне для всієї цієї плутанини. Код CJC-1295 присвоєно конкретній молекулі з тридцяти залишків — разом із малеїмідопропіоніл-лізином. Це не «базова речовина, до якої за бажанням додають DAC», а завершена структура, у якій тридцятий залишок такий самий обов'язковий, як перший. Заберіть його — і ви отримаєте тетразаміщений GRF(1-29), сполуку, якій у тій статті взагалі не давали номера: вона там фігурує лише як каркас.

Ще одна деталь, яка розставляє все по місцях: DAC узагалі не належить GRF. Drug Affinity Complex — це технологічна платформа ConjuChem, і той самий малеїмідний якір компанія чіпляла до зовсім інших пептидів: CJC-1131 — аналог GLP-1(7-36) з тим самим механізмом зв'язування з альбуміном, CJC-1134-PC — кон'югат ексендину-4. Тобто «з DAC» описує наявність однієї хімічної групи, а не форму випуску, не концентрацію й не «покоління» речовини.

Фактор, гормон і система імен, у яку ці молекули не потрапили

Друга половина безладу старша за ConjuChem років на двадцять і має суто термінологічну природу. Коли на початку 1980-х речовину, що змушує гіпофіз викидати гормон росту, виділили з пухлини підшлункової залози, її назвали фактором — growth hormone-releasing factor, GRF. Слово «фактор» в ендокринології означає рівно одне: активність спостерігається, структура ще не встановлена. Це чернетка назви, тимчасова заглушка.

Щойно послідовність описали, заглушку мали замінити. Речовина з відомою структурою, яку виробляє гіпоталамус і яка через кров діє на віддалену залозу, — це гормон, і в літературу зайшла абревіатура GHRH, growth hormone-releasing hormone. Але стара з обігу не вийшла, бо на неї вже посилалися сотні статей. Так утворилася пара синонімів, у якій GRF(1-29) і GHRH(1-29) — це той самий набір із двадцяти дев'яти амінокислот, записаний двома різними способами.

Український ринок успадкував саме старіший варіант і транслітерував його по літерах: G-R-F перетворилося на ГРФ. Звідси «мод ГРФ 1-29» — гібрид, у якому перша частина скорочена з англійського modified, а друга є кириличною калькою абревіатури, яку сама англомовна література вважає застарілою. Нормальна українська назва тієї самої речовини — соматоліберин, і фрагмент звучав би як «модифікований соматоліберин 1-29». Так його не шукає майже ніхто.

А тепер найкорисніша частина цієї археології. У фармакології є механізм, який не дає одній речовині мати п'ять назв, — система міжнародних непатентованих назв ВООЗ. Вона працює на суфіксах. За пептидами, що стимулюють вивільнення гіпофізарних гормонів, закріплено суфікс -relin; за вужчою групою, яка працює на осі гормону росту, — -morelin.

Подивіться, як акуратно лягає ця родина. Повний 44-ланковий GHRH — соматорелін. Фрагмент 1-29 — серморелін. Ацильований аналог із trans-3-гексеноїльною групою — тезаморелін. Селективний агоніст грелінового рецептора — іпаморелін. Кожна з цих назв однакова в усіх мовах і країнах, і кожна прив'язана до однієї-єдиної послідовності.

Ні CJC-1295, ні Mod GRF 1-29 у цьому списку немає — і не тому, що комітет їх відхилив. Заявку на непатентовану назву подає сам розробник; це добровільний крок, який має сенс перед виходом на реєстрацію. ConjuChem зупинила розробку CJC-1295 на другій фазі, а тетразаміщений каркас на реєстрацію не подавали взагалі. Немає заявки — немає процедури, немає публікації в списках ВООЗ, немає закріпленої назви. Порожнє місце заповнили внутрішній код компанії та описові ярлики продавців, і кожен із них зажив власним життям.

Саме тут народився ретронім. Власне ім'я в тетразаміщеного каркаса було — Mod GRF 1-29, скорочення від modified GRF, — але воно не гуглилося так добре, як код із цифрами, і в частині каталогів його переписали на «CJC-1295 without DAC». Різниця між «серморелін» і «CJC-1295 без DAC» не в тому, що одне слово точніше за інше. Різниця в тому, що за першим стоїть процедура, а за другим — нічого.

Geref: єдина з трьох, що була ліками

З трійки, яка є темою цього тексту, лише немодифікований фрагмент 1-29 колись продавався в аптеці. Sermorelin acetate під торговою назвою Geref схвалили в США 26 вересня 1997 року за показанням «ідіопатичний дефіцит гормону росту в дітей із затримкою росту». Формати були звичайні для того часу: флакони по 0,5 і 1,0 мг основи та ампули по 0,05 мг.

У грудні 2008 року виробник припинив випуск. Це рідкісний випадок, коли причина зафіксована документально й публічно: 4 березня 2013 року FDA опублікувало у Federal Register формальне визначення, що Geref знято з продажу не з міркувань безпеки й не через недостатню ефективність. Формулювання не косметичне, воно має конкретний юридичний наслідок — після такого рішення препарат лишається в розділі припинених продуктів Помаранчевої книги, і на нього можна подавати скорочені заявки на генерики.

Двері лишили відчиненими, але ніхто не зайшов. Показання вузьке, рекомбінантний гормон росту як конкурент сильніший, а пептидний синтез дорожчий. Для цієї теми з історії Geref важливий один висновок: серморелін — єдиний із трьох, у кого є повний набір регуляторних документів із датами, номерами й формулюваннями, які можна перевірити. Двоє інших не мають нічого подібного, і будь-яке твердження про них спирається на публікації, а не на досьє. Тому серморелін у каталозі — позиція з найпрозорішим походженням даних, хоча постачається так само як реактив.

Десять дальтонів, які видно, і хіральність, якої не видно

Тепер до чисел, бо саме вони, а не назви, ідентифікують товар. Тетразаміщений каркас відрізняється від сермореліну чотирма позиціями, і кожна заміна дає передбачувану зміну маси.

Позиція	Було	Стало	Зміна маси, Да
2	L-Ala	D-Ala	0
8	Asn	Gln	+14,03
15	Gly	Ala	+14,03
27	Met	Leu	−18,03

Складіть праву колонку: нуль плюс 14,03 плюс 14,03 мінус 18,03 дає рівно +10,03. Тому мод ГРФ 1-29 важить 3367,95 г/моль — це серморелін (≈3357,9) плюс десять дальтонів. Формула змінюється так само передбачувано: C149H246N44O42S перетворюється на C152H252N44O42, тобто додається C3H6 і зникає S. Сірка була в метіоніні, лейцин її не має.

З цієї арифметики випливають два наслідки, про які майже не пишуть. Перший: десять дальтонів на 3360 — це три десятих відсотка. Мас-спектр таку різницю бачить без проблем, а сертифікат, у якому маса записана як «≈3,4 кДа», не розрізняє серморелін і модифікований каркас узагалі. Вимагайте масу з десятковими знаками, інакше документ не робить того, заради чого його читають.

Другий наслідок цікавіший і майже ніколи не проговорюється вголос. Подивіться на верхній рядок таблиці: заміна L-аланіну на D-аланін дає нуль. Дзеркальні ізомери мають однаковий атомний склад і важать однаково до останнього знака. Отже, жоден мас-спектр не доведе, що в другому положенні стоїть саме D-форма, — а це та єдина заміна, заради якої вся конструкція й затівалася, бо дипептидилпептидаза-4 не читає дзеркальний ізомер.

Причіпка не теоретична. D-аланін у синтезі дорожчий за L-аланін, а партія, у якій друге положення зайняв звичайний L-Ala, дасть у сертифікаті ту саму брутто-формулу, ту саму масу 3367,95 і цілком пристойний відсоток чистоти за ВЕРХ. Відрізнити її можна лише окремим методом: пептид гідролізують, продукти гідролізу дериватизують реагентом Марфі (1-фтор-2,4-динітрофеніл-5-L-аланінамід), і вже утворені діастереомери розділяються на зворотній фазі — L-амінокислота дає одну пару, D-амінокислота іншу. У точних варіантах методики гідроліз ведуть у дейтерованій кислоті, щоб позначити дейтерієм ті залишки, які рацемізують уже під час самого гідролізу; без цієї деталі метод показує домішку D-форми там, де її не було. У звичайному сертифікаті аналізу такого розділу немає, і питати про нього треба окремо.

Тридцятий залишок: 128,2 плюс 151,1

До C-кінця модифікованого каркаса додають лізин, до бічної аміногрупи якого пришито малеїмідопропіонільну групу. У плазмі крові найдоступніша й найреактивніша вільна SH-група — цистеїн-34 сироваткового альбуміну: його pKa близько 5,5, тому при фізіологічному pH він переважно в іонізованій формі й реагує з малеїмідом на порядки швидше за вільні тіоли інших білків крові. Тому кон'югат утворюється практично лише з альбуміном, у співвідношенні один до одного.

Маса прибудови рахується прозоро. Формула зростає з C152H252N44O42 до C165H269N47O46, тобто додається C13H17N3O4. Це 279,3 дальтона, і вони розкладаються на дві частини: 128,2 припадає на залишок лізину, 151,1 — на малеїмідопропіоніл. Додайте 279,3 до 3367,95 і отримаєте 3647,25 — рівно те число, яке стоїть у специфікації CJC-1295 з DAC. Три числа, які варто тримати в голові: 3358, 3368, 3647.

Фармакокінетичний наслідок прибудови виміряний: Тейхман (Teichman) зі співавторами (The Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism, 2006, т. 91, с. 799–805) розрахували для CJC-1295 період напіввиведення 5,8–8,1 доби проти приблизно тридцяти хвилин у форми без DAC. Пульсовий характер секреції гормону росту при цьому зберігається: Іонеску (Ionescu) і Фроман (Frohman) не побачили змін ні в частоті, ні в амплітуді нічних секреторних піків після введення — зросло базальне значення між ними (там само, 2006, т. 91, № 12, с. 4792–4797).

Як звірити те, що вам продають

Попри весь безлад із назвами, три молекули розрізняються приладом однозначно. Треба лише знати, куди дивитися.

Як називають у каталогах	Залишків	Формула	Маса, г/моль	CAS
Sermorelin, GRF 1-29, соматоліберин 1-29	29	C149H246N44O42S	≈3357,9	86168-78-7
Mod GRF 1-29, мод ГРФ 1-29, CJC-1295 без DAC, тетразаміщений GRF(1-29)	29	C152H252N44O42	≈3367,9	863288-34-0 або 446036-97-1
CJC-1295, CJC-1295 з DAC, DAC:GRF	30	C165H269N47O46	≈3647,2	446262-90-4

Порядок перевірки виходить такий. Слово «CJC-1295» саме собою не ідентифікує нічого — питайте форму. Далі дивіться сертифікат аналізу на конкретну партію: маса ≈3647 означає тридцять залишків і DAC, маса ≈3368 — двадцять дев'ять і жодного DAC. Ці два числа розходяться на 279 дальтонів, у мас-спектрі така прірва видна неозброєним оком. Складніше з парою серморелін / мод ГРФ 1-29: між ними десять дальтонів, і тут рятує брутто-формула — у сермореліну в ній є сірка, у модифікованого каркаса її немає. Далі йде третій рівень, хіральність другого залишку, і його не закриває ні маса, ні формула.

І остання дрібниця. Якщо продавець пише «мод ГРФ 1-29» кирилицею, а в специфікації стоїть 3647 — це не мод ГРФ. Якщо пише «CJC-1295 з DAC», а маса 3368 — це не CJC-1295. Назви можуть брехати, бо за ними ніхто не наглядає: у цієї родини немає ні непатентованої назви, ні реєстрації, ні органу, який відповідав би за відповідність слова структурі. Маса брехати не вміє.

Що з цього справді є в каталозі

Тут потрібна пряма відповідь, бо запит «мод грф 1-29 купити» веде й на цю сторінку, а торгувати двозначністю після двох тисяч слів про двозначність було б смішно.

Окремим флаконом мод ГРФ 1-29 у Polar Peptides не продається. Тетразаміщений каркас у каталозі є, але у складі комбінації CJC-1295 + Ipamorelin: у специфікації тієї позиції для першого компонента вказані формула C152H252N44O42 і маса 3367,95 г/моль, тобто саме двадцятидев'ятичленна форма без DAC. Другий компонент, іпаморелін, — пентапептид Aib-His-D-2-Nal-D-Phe-Lys-NH2 масою 711,87 г/моль, окрема молекула з окремою мішенню, і в поєднанні вона грає свою роль, а не «підсилює» першу.

А те, що продається під карткою CJC-1295, — це версія з DAC: тридцять залишків, 3647 г/моль, інша фармакокінетика. З усього сказаного вище зрозуміло, що це не «сильніший мод ГРФ», а інша речовина. Якщо вам потрібен саме короткодіючий каркас окремо, без пентапептиду поруч, такої позиції в нас зараз немає — і чесніше сказати це прямо, ніж підсунути під знайомою назвою сусідній товар. Суміжні аналоги GHRH зібрані в розділі Growth, де в кожної позиції формула, маса й CAS винесені в специфікацію — щоб звірка з COA займала хвилину й не залежала від того, як товар названо на етикетці.

Часті запитання

Мод ГРФ 1-29 і «CJC-1295 без DAC» — це одна речовина?

Так, це два написання одного й того самого: тетразаміщеного фрагмента GRF(1-29) із двадцяти дев'яти амінокислот, формула C152H252N44O42, маса приблизно 3367,9 г/моль. Але друга назва хімічно некоректна, і причина конкретна. Код CJC-1295 у першоджерелі присвоєний завершеній структурі з тридцяти залишків, включно з малеїмідопропіоніл-лізином на C-кінці; у статті 2005 року всі три описані конструкції — CJC-1288, CJC-1293 і CJC-1295 — цей тридцятий залишок містять. Каркас без нього номера не отримав узагалі, тож «CJC-1295 без DAC» описує молекулу, якої під таким кодом ніколи не існувало. Історично коректне ім'я — Mod GRF 1-29, кирилицею «мод ГРФ 1-29».

Чи можна за сертифікатом аналізу відрізнити D-аланін від L-аланіну?

За стандартним COA — ні, і це головна сліпа пляма всієї категорії. Мас-спектрометрія тут безсила за визначенням: D-Ala і L-Ala мають однаковий атомний склад, тому партія з «неправильним» аланіном у другому положенні покаже ту саму масу 3367,95. Потрібен окремий аналіз хіральної чистоти: пептид гідролізують, продукти дериватизують реагентом Марфі, і утворені діастереомери розділяються звичайною зворотнофазною ВЕРХ. Коректна методика передбачає гідроліз у дейтерованій кислоті, бо частина амінокислот рацемізує прямо під час гідролізу й дає хибну домішку D-форми. Просити треба саме звіт про хіральну чистоту або підтверджену послідовність із зазначенням ізомеру, а не «мас-спектр» — його вам покажуть, і він нічого не доведе.

Чому для форми без DAC в обігу два різні CAS-номери?

У каталогах ходять 863288-34-0 і 446036-97-1; перший подає ChemicalBook, другий — Cayman Chemical, GlpBio і Biosynth. Обидва ведуть до тієї самої формули C152H252N44O42 і тієї самої маси 3367,9. Реєстраційний номер присвоюють за описом структури в конкретному документі, і речовина, описана двічі різними словами — скажімо, як «тетразаміщений GRF(1-29)» і як окремий модифікований аналог, — цілком може отримати два записи; чому саме тут виникло дублювання, публічно ніде не пояснено. Практичний висновок від цього не залежить: жоден із двох номерів сам собою не є ознакою підробки. Ознакою є інше — номер 446262-90-4 на картці товару без DAC, бо він належить тридцятиланковій молекулі.

Якщо Geref працював, чому його зняли з виробництва?

Тому що на ньому не заробляли, і це не здогад. 4 березня 2013 року FDA опублікувало у Federal Register окреме визначення: Geref (серморелін ацетат) знято з продажу не з міркувань безпеки й не через недостатню ефективність. Таке рішення регулятор ухвалює саме для того, щоб препарат лишився в переліку припинених продуктів Помаранчевої книги і щоб на нього можна було подавати скорочені заявки на генерики. Двері лишили відчиненими, охочих не знайшлося: показання «ідіопатичний дефіцит гормону росту в дітей» вузьке, рекомбінантний гормон росту як конкурент сильніший, а пептидний синтез дорожчий. Випуск припинили в грудні 2008 року, тобто за чотири з половиною роки до самого визначення.

Чому одні молекули цієї родини мають міжнародну непатентовану назву, а інші ні?

Тому що назву не присуджують автоматично. Заявку до ВООЗ подає сам розробник, і робить це зазвичай тоді, коли готується виводити речовину на реєстрацію. Далі назву публікують спочатку як пропоновану, дають чотири місяці на заперечення від будь-кого зацікавленого, і лише після цього вона стає рекомендованою — нормою для країн-членів. Серморелін, тезаморелін, соматорелін та іпаморелін цю процедуру пройшли, тому їхні імена однакові будь-якою мовою й позначають рівно одну структуру. CJC-1295 зупинили на другій фазі, тетразаміщений каркас на реєстрацію не подавали взагалі: заявки не було, процедури не було, закріпленої назви немає. Її місце й зайняли внутрішній код компанії та ярлики продавців.

Матеріал має інформаційний характер. Усі продукти Polar Peptides призначені виключно для лабораторних досліджень і не для споживання людиною, медичного чи діагностичного застосування.